胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。
血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清保存及使用注意事項(xiàng):
1、保存溫度
血清一般保存在-20℃以下保存,使用之前應(yīng)放置2-8℃冰箱過夜溶解。使用建議1周-2周內(nèi)用完,如用量小建議小包裝分裝凍存,以免反復(fù)凍融,血清失效。
2、是否要滅活
熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理之目的是使血清中補(bǔ)體成份(complement)去活化。除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闀?huì)造成沈淀物之顯著增多,且會(huì)影響血清之品質(zhì)。
3、為何會(huì)有沉淀
凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中脂蛋白(lipoprotein)變性及解凍后胎牛血清中存在血纖維蛋白(fibrin)造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。
若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜,并且會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)流失,細(xì)胞狀態(tài)不好。